利用金纳米粒子检测信使RNA的数量
信使RNA是由DNA经剪接而成携带遗传信息,在蛋白质合成时充当模板的RNA。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板,决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器(如线粒体和叶绿体)中。
BRCA1是一个抑癌基因,能够在某些情况下,将一个细胞转变为肿瘤类型。测量一个细胞中BRCA1 mRNA剪接变体的数量,可以显示这个基因是否正在表达,这是乳腺癌一个可能的迹象。但是,目前检测癌症的方法,都依赖于数百或数千个细胞所组成的样本,不能提供癌症相关基因如何在单个细胞内表达的详细信息。
近期,普渡大学的研究人员利用金纳米粒子靶定和结合称为BRCA1 mRNA剪接变体的遗传物质片段,这种剪接变体能显示乳腺癌的存在和阶段。通过检测光与金纳米粒子相互作用时所产生的特殊信号,可以确定一个细胞中这些mRNA剪接变体的数量。这项成果为基于单细胞的遗传分析和诊断铺平了道路。相关文章发表于2014年4月20日的《Nature Nanotechnology》杂志上。
当注入细胞后,金纳米粒子就附着于BRCA1 mRNA 剪接变体的任意一端,形成被称为二聚体的结构,遇见光时,会发出一种独特的信号,因此,研究人员就能够通过利用一个简单的光源照射细胞,来测量二聚体的数量。一个细胞中二聚体的数量,与BRCA1 mRNA剪接变体的数量相对应。当光照在一个金纳米粒子上时的表现有所差异,从而可让研究人员能够将二聚体和自由浮动的金粒子区别开来。研究人员用两种方法来量化二聚体:光谱法,测量遇见一个物体时的光散射方式,和一个比色图像,在上面二聚体显示为红色的点,而单个金粒子则呈绿色。
该技术可以在大约30分钟内,量化单个细胞中的mRNA剪接变体。Irudayaraj正在修改系统,以加快这个过程,以便其可以用于组织活检。他说:“如果我们能够在组织活检中以单细胞分辨率量化关键的mRNA,对于重要疾病的治疗方案改善来说,将非常的强大。”