因优化信号选择金粒子的大小
纳米金因其良好的生物适应性和独特的光学性能被广泛用于生物标记检测,大量的研究表明,只有尺寸均一的球形金纳米粒子才有最佳的标记效果。是否纳米粒子尺寸越小,标记效果越好呢?
不是。标记检测信号是由金颗粒聚集于测试线或控制线而出现的信号。这些粒子必须足够大到能被看见,粒子的尺寸越大,这些粒子聚集后就越容易被看见。例如1nm直径的粒子,无论其聚集数量多少几乎都是不可能被看见的,因为1nm的粒子没有更大粒子所具有的亮红色。只有直径达到20nm的粒子才会出现可见的信号。随着粒子尺寸的增大,位阻现象又成了一个问题。例如,如果IgG(160,000道尔顿)分子仅仅8nm长,大约4nm从金颗粒表面伸展开,那么,100nm的粒子将会使这些小的表面分子显得更小而很难与特异性的蛋白相互作用。此外,这些粒子的尺寸越大,它们在既定体积溶液中存在的数量越小。
这种可见度的需要与位阻现象之间的矛盾现象表明,对于大多数的免疫检测应用而言,最适的粒子大小是40nm.在某些情况下当位阻现象成为较大问题时(如针对较小的抗原),20nm的粒子则更为合适;当希望出现更深颜色或当分子表面较低的曲率提高了抗原抗体分子间的交互作用,较大一点的粒子则更为可取。应该由实验决定确定多少颗粒大小能带来高灵敏度、浅背景色和高稳定性。