吸光度与四环素类药物浓度的关系图
四环素类药物是由放线菌属产生或半合成的一类广谱抗生素, 是四并苯或萘并萘的衍生物. 四环素类药物对许多革兰氏阴性菌和阳性菌及立克次氏体、肺炎支原体、衣原体、螺旋体、放线菌等都有抗菌活性, 可作为预防和治疗畜禽疾病的兽药或作为促进畜禽生长的饲料添加剂应用于可食性动物中. 但过量使用将使母体、代谢产物等相关抗生素残留于动物组织中, 影响人体健康. 因此, 建立快速、简便、灵敏的检测四环素类药物的分析方法, 对保障食品安全具有重大意义.
目前, 测定四环素类药物的方法主要有液相色谱法、荧光光谱法、分光光度法、电化学分析法和生物测定法等. 其中高效液相色谱法需要昂贵的仪器, 荧光光谱法存在光漂白的问题, 电化学分析法重现性不好, 生物测定法实验周期长且不够灵敏, 分光光度法虽不需要昂贵的仪器, 操作简便, 但线性范围较窄.
金纳米颗粒由于其独特的光学性质已被广泛地应用于药物分析、化学传感和细胞成像等领域. 当光作用于金纳米颗粒表面时, 其表面自由电子与光波产生共振,使其在特定波长产生强烈的等离子体共振吸收.
西南大学化学化工学院刘春芳等人研究发现, 在pH 9.37的BR缓冲体系中, 典型四环素类药物盐酸土霉素、盐酸多西环素、盐酸四环素、盐酸金霉素与氯金酸发生氧化还原反应生成的金纳米颗粒在500~550 nm 波长范围内显示出特征的等离子体共振吸收, 且吸光度值与四环素类药物的浓度在一定范围内呈良好的线性关系, 据此建立了测定四环素类药物的等离子体共振吸收分析新方法. 该方法能分别检测0.5~20, 0.5~16, 0.5~16, 0.5~20mol/L 范围的盐酸土霉素、盐酸多西环素、盐酸四环素和盐酸金霉素, 对应的检出限分别为0.20, 0.16, 0.15, 0.18 mol/L. 对浓度为20.0 mol/L的盐酸土霉素进行了15次平行测定, 其相对标准偏差为1.53%. 该方法成功用于合成样和片剂中土霉素的测定, 且根据溶液颜色变化实现了上述四环素类药物的三原色可视化定量检测.