免疫分析过程
电化学免疫传感技术, 是一种将特异性抗原抗体免疫结合后, 产生相应的电信号的方法, 它可直接、快速、灵敏地测定试样中的抗原或抗体. 因所需仪器设备相对简单, 在临床医学中具有广泛的应用前景. 然而, 传统的电流型、电容型或阻抗型电化学免疫传感器, 制备较为复杂, 且不易再生, 同时灵敏度也不够理想. 简单、高灵敏的电化学免疫分析方法, 仍然是免疫学测定中追求的目标. 胶体金标记技术由于标记物的制备简便, 方法敏感、特异, 不需使用放射性同位素或有潜在致癌性的酶显色底物, 已在光镜和电镜水平的免疫组化研究、流式细胞术、液相免疫测定以及各种固相免疫分析, 如免疫转印、斑点免疫结合试验等体外免疫加层试验(immune overlay assay)等各种免疫学测定中得到广泛的应用.
但这些方法所需分析物(如抗原)的浓度较高, 且假阳性或假阴性比例高, 限制了免疫检测的灵敏度和准确性. 近年来, 利用标记纳米金交联放大效应实现目标核酸片段的灵敏分析, 已有文献报道。
湖南大学化学化工学院沈国励等人报道了一种用金标复合物放大的计时电位法测定补体C3的电化学免疫检测方法. 对影响传感器响应的因素如蛋白A固定浓度、抗体包被过程的pH及浓度、金标物混合比等进行了考察. 在优化的实验条件下, 传感器的信号响应和补体C3的浓度在0.12～117.3 ng/mL范围内具有良好的线性关系, 检出限达0.02 ng/mL。