什么形貌的纳米金适合作检测标记

2016-06-13
研发部

                              优质胶体金与劣质(不稳定)胶体金

  胶体金及交联物的生产制造表面看似简易,若掉以轻心则可导致生产出劣质、性能差及重现性极差的产品进而影响其商业用途。将这样的产品应用于快速检测中可能导致结果的低稳定性、低敏感性及低特异性。为防止这样的结果出现,应使用透射电子显微镜(TEM)来评价胶体金的超细微结构。这种检测能使生产者对照标准比较胶体的直径,得到颗粒球状、颗粒不规则性和颗粒直径的变化。

如果还原过程中核化作用及形成速度没有得到很好控制,粒子的形成就会不均一。所见的粒子可能具有不同的大小及形状(如椭圆形、三角形、长方形、菱形等等)。这样的粒子在与蛋白的结合过程中将无法被均匀包被,也不能在溶液中均匀分布。最终将影响产品的颜色、敏感性、特异性及稳定性。仅仅5%形状不均一的粒子都会影响测试的结果,使其完全不具重现性。与代表着制作精良的40nm的单分散性胶体粒子的樱桃红色相比,由“劣质金”所形成的信号常可见到淡蓝色或紫色。虽然在检测系统中白色背景膜上较暗的颜色更容易辨别,但暗示着潜在的不稳定性,而这种不稳定性更容易造成错误的结果。更严重的是,粒子形状及尺寸的不均一会导致蛋白包被的不均一,这样会导致交联物长时间的积聚与凝集,储存于溶液中的交联物可能于几天甚至几个小时内就出现这样的变化。

        即使立即将交联物干燥于固相基质上也无法完全克服这个问题,在干燥过程中,由于粒子形状而未稳定结合的表面蛋白很容易分离,造成假阳性及高背景。

        快速检测操作过程中一个最常见的问题就是金交联物不能以适当的速度及完整形式从玻璃纤维结合垫上释放,这个问题常常是因为未完全包被的金颗粒直接暴露在玻璃纤维材料上而不能释放。这必然意味着表面蛋白或者永久地附着在纤维基质上或离开金颗粒自由飘浮。开始就具备包被均一的单分散性球形粒子再加上制备完好的金交联物,可大大减少这种危险问题的发生。

       尽管TEM检测是决定胶体质量的唯一正确方法,但鉴定胶体或交联物是否包含融合的、凝集的或者不均一粒子亦或含有不同大小粒子群体的快速方法就是目测它的颜色。优质的40nm(诊断应用中最常使用的粒子大小)的胶体应该显示樱桃红色。如果胶体或交联物出现紫色,很有可能说明其质量低劣且不稳定。

来源:内江洛伯尔材料科技有限公司