免疫胶体金技术
金免疫组织化学染色技术包括免疫金(银)光镜染色技术和免疫金电镜染色技术。
一、免疫金(银)光镜染色技术
原理：通过免疫反应沉积在抗原位置的胶体金颗粒起着一种催化剂作用，用对苯二酚还原剂将银离子还原成银原子，被还原的银原子围绕金颗粒形成一个银壳，银壳一旦形成本身亦具有催化作用，从而使更多银离子还原并促使银壳越长越大，最终使抗原位置得到清楚放大。
技术要点：1、配制银染色液；2、染色
注意事项：1、此法具有分辨率高、定位精确的优点；2、所用玻璃器皿应洁净，所用蒸馏水必须双蒸或三蒸；3、配制胶体金溶液时，调整各试剂的比例可获直径不同的金颗粒。直径>l0nm的金粒子不易穿透组织，故作细胞内抗原定位时，以配制直径5nm的金溶胶为宜；4、硝酸银、对苯二酚溶液应避光保存并临用时现配；5、被检血清中有其他自身抗体，如抗平滑肌抗体、抗心 肌抗体、抗线粒体抗体等时，其抗原片应根据专门试验的要求制备。
二、免疫金电镜染色技术
原理：胶体金标记物与镍网上待检标本的相应蛋白质发生结合反应,由于胶体金颗粒具有高电子密度的特性，故金标蛋白结合处，电镜下可见黑褐色颗粒，从而对细胞膜上或细胞内的蛋白质进行定性与定位。
技术要点：1、标本包理 用戊二醛对标本进行固定，后行锇酸固定(固定膜结构)，丙酮或乙醇逐级脱水，包埋(Epon812树脂)，超薄切片(80nm)置300目镍网上；2、免疫组化染色白蛋白封闭，加第一抗体，孵育，PBS冲洗，卵白蛋白封闭，加第二抗体(胶体金标记IgG )，孵育，PBS冲洗，蒸馏水冲洗，醋酸双氧铀、枸橼酸铅复染，电镜观察。
注意事项：1、以上染色步骤除清洗外，皆在滴于蜡膜（封口膜）上的各种液体小滴上进行。应注意始终保持镍网湿润，不得让任何一种液体干于网上，并要吸去镊子尖部夹起的多余液体；2、用于电镜观察的免疫金法可分为包埋前染色和包埋后染色两大类，包埋后染色具有简便可靠，结果重复性好，能在同一组织切片上进行多重免疫染色的优点，但会使某些抗原失活，不易保持细胞膜结构完整。
三、临床应用与评价
1、金免疫组织化学染色技术在电镜水平的应用
主要应用于：①细胞悬液或单层培养细胞细胞表面抗原的观察；②单层培养细胞细胞内抗原的检测；③组织抗原的检测。该法样本用量少，检测速度快，对比明显，操作简单，敏感性高和特异性好，既可用于抗原检测，也可用于抗体检测，因此，可同时适用于科研和诊断。
2、金免疫组织化学染色技术在光镜水平的应用
主要应用于：①用单克隆抗体或抗血清检测细胞悬液或培养的单层细胞的膜表面抗原；②检测培养的单层细胞胞内抗原；③组织中或亚薄切片中抗原的检测。胶体金用于光镜水平的研究，可以弥补其它标记物不可避免的本底过高和内部酶活性干扰等缺点。