ECL生物条形码方法定量检测转基因产品示意
2004年,Bard小组将聚苯乙烯微球作为{Ru(bpy)3[B(C6F5)4]2}的载体,合成了多标记{Ru(bpy)3[B(C6F5)4]2}的聚苯乙烯微球,通过在多标记ECL活性物质的载体上固定目标ssDNA,然后与附着到磁性微粒表面探针ssDNA杂交,建立了一种超灵敏DNA杂交检测方法,该方法对目标DNA的检出限达到1.0fmol/L。
2008年至2010年,邢达小组利用功能化纳米材料作为高效的信号放大载体,发展出一种非PCR扩增的高灵敏度ECL生物条形码基因检测新技术。利用金纳米粒子表体比大的特性,构建一种新型的ECL纳米探针。通过在金纳米粒子上共标记大量ECL信号分子--三联吡啶钌及目的基因捕获探针。
利用双探针杂交原理,生物素化的核酸探针和ECL纳米探针与目的基因共杂交。由于生物素与链霉亲和素具有特异的高亲和性,杂交产物通过链霉亲和素修饰的磁性微球捕捉,磁性微球捕获的杂交产物可以在电极表面原位检测。此方法通过纳米粒子的信号扩增和磁富集特性,能灵敏地检测低至5埃摩尔(10-18mol)的基因数量。该方法成功地应用于转基因物种和端粒酶活性的非PCR扩增检测。