纳米金免疫电极的制备方法
免疫传感器检测技术是将免疫检测技术与传感检测技术相结合而形成的一类新型检测技术,是生物传感器领域发展最迅速的技术之一,具有灵敏度高、特异性强、检测快速、使用简便、低成本和容易实现在线检测等许优点。电流型免疫传感器是免疫传感器的一 种类型,通常由转换元件(支持电极)、生物敏感元件(抗体或抗原修饰的工作电极)、电解池以及数据采集与处理系统组成,通过检测抗原-抗体反应前后电流的变化而实现定性/定量检测。近十余年来,电流型免疫传感器在医学、动物医学、环境分析和食品安全检测等多领域中得到了广泛的研究,其中工作电极上生物分子的组装技术一直是该研究领域的关键内容。目前,纳米金颗粒因具有比表面积大、表面活性位点多、吸附力强、光电特性优良、生物亲和性强以及能在一定程度上保持蛋白质活性等优点,已被作为吸附和支撑生物分子的良好载体而应用于免疫传感器的研究中。
本文提供了一种在免疫传感器工作电极表面组装纳米金颗粒和连接特异性抗体来制备纳米金免疫电极的方法。具体技术方案如下:
a.将圆盘金电极依次用直径为I μ m、0. 3 μ m和O. 05 μ m的氧化招粉末抛光至光売;
b.抛光后的电极用浓硫酸和过氧化氢混合液浸泡10分钟;
c.取出电极,依次于无水乙醇和双蒸水中用超声波清洗15分钟;
d.将清洗后的电极放入O. 5M硫酸溶液中,用循环伏安法在-O. 3〜I. 5V电压下抛光30分钟,晾干备用;[0010] e.以氯金酸电解液为底液,采用线性循环伏安扫描法,在圆盘金电极上沉积纳米金颗粒,得纳米金电极;
f.将纳米金电极浸入O. 5μ g/ml的抗体溶液中,室温下孵育20分钟后取出,用0.25%小牛血清封闭15分钟,纯水洗净后晾干备用,得纳米金免疫电极。
此方案制备纳米金免疫电极的方法融合了电沉积技术和纳米金技术,具有简单、快速、有效的优点,可大幅缩短试验周期、降低试验成本,并提高免疫传感器的稳定性和灵敏度。利用该方法组装的工作电极灵敏度高,特异性强,稳定性好,制作成本低,可大幅提高免疫传感器制作效率和质量。