一种制备肝素修饰的金纳米粒子的方法
近年来,随着纳米科技的兴起，金纳米粒子表面自组装受到了广泛的关注，纳米尺度的金粒子以其独特 的性质在许多领域表现出潜在的应用价值，引起了人们浓厚的研究兴趣。金纳米粒子是最稳定的金属纳米粒 子，纳米尺度的金粒子具有独特的、与尺寸相关的光学、热学、电学、磁学以及化学等方面的性质：如表 面等离激元共振吸收(SPR),拉曼散射(RS),以及高的催化活性、生物相容性和稳定性等。这些特性使得金 纳米粒子(GNPs)在分析、催化、光电器件、生物传感器、生物医学等方面具有重要的应用。哺乳动物的细胞表面有一层密集的多糖一蛋白质复合物的碳水化合物，这些复合物与生理学和病理学 研究都有很大的联系，如：新陈代谢，发炎，传染等。肝素（heparin)则是一类高度硫酸化的硫酸乙酰肝素。硫酸乙酰肝素由于具有大量的负电荷，很容易 与病毒表面带正电的蛋白质之间产生非特异性的静电作用，从而使病毒黏附在细胞表面，在多种病毒入侵 细胞的最初阶段发挥着重要的作用。
本文的目的是提供一种制备肝素修饰的金纳米粒子的方法。具体技术方案如下：lg的肝素，用l: 1〜1: 20的0.5M tbS04和5.5M NaN02溶液配制成5mlHN02溶液降解，在0〜10'C下反应0.5〜4小时，反应中需时常振摇 溶液，反应结束后，用3mll: 1: 1〜1: 10: 10的1M Na2C03、 H20、 1MNaHC03的混合溶液中和，调 节pH至7，将所得溶液用500ml〜1000ml的50mMNH4HCO3溶液透析三次冻干，得到还原末端为醛基的 低分子量肝素；1 g上述还原末端为醛基的低分子量肝素，溶解于10〜100ml的0.2M磷酸盐缓冲液 (pH7.0)，再加入10ml 0.1〜1M的巯基乙胺或对巯基苯胺，和1〜2 g的氰基硼氢化钠催化剂，在55〜65 'C温度下，反应2〜10小时，得到的溶液透析冻干，得到带巯基的低分子量肝素；制备快速检测病毒的金 纳米粒子，先向的20ml 1〜5mM氯金酸溶液中加入5m10.01〜0.1 mM的硼氢化钠或柠檬酸钠还原剂，在 65〜100'C的温度下反应0.5〜3小时后，加入0.1〜10g上述的带巯基的低分子量肝素，常温搅拌0.5〜2小 时，将得到的金纳米粒子溶液用10000〜30000r/min的离心机离心后，用10〜100ml的10mM的Tris-HCl 缓冲液（pH7.6)重新溶解，上述步骤重复三次，得到肝素修饰的金纳米粒子溶液。
与其他检测方法相比，本方案有以下的优点：首先制备了带巯基的低分子量肝素修饰的金纳米粒子， 合成纳米粒子的步骤简单易操作，成本低，而且稳定性好。并且可用于病毒和蛋白质的检测，本发明 在纳米诊断领域扩展了新的方向。